1996年，马伊琍和保剑锋等人共同主演其第一部电视剧《真空爱情记录》，扮演夏文心，该剧是中国内地第一部偶像剧。1998年，马伊琍从上海戏剧学院表演系毕业后，出演了个人第一部影片《玻璃是透明的》。1999年，马伊琍出演青春励志剧《理想万岁》。2001年，出演家庭伦理剧《给我一支烟3：今夜无眠》。2002年9月份，马伊琍主演管虎执导的剧情片《西施眼》；11月份，在古装剧《铁齿铜牙纪晓岚续》中扮演颜如玉。2003年7月份，在琼瑶剧《还珠格格第三部：天上人间》中，因扮演夏紫薇一角而被大众所熟知。9月份，在李亚鹏主演的情感剧《谁都会说我爱你》中扮演女二号；10月份，马伊琍主演管虎执导的悬疑剧《七日》。2005年9月份，马伊琍主演都市情感剧《五妹》。

　　2006年2月份，马伊琍与陈建斌等人共同主演古装商战剧《乔家大院》，扮演江雪瑛，并凭借该剧获得第23届中国电视金鹰奖-观众喜爱的女演员奖。4月份，马伊琍与黄磊等人共同主演民国情感剧《天一生水》；10月份，马伊琍主演古装剧《锦衣卫》。2007年符巴5月份，与佟大为等人共同主演青春励志剧《奋斗》，因扮演夏琳一角而获得更多关注，并凭借该剧分别获得2007BQ红人榜-年度艺术红人奖，以及2008-2009风尚权力榜-风尚最受欢迎女演员奖；9月份，马伊琍主演剧情片《江北好人》，并凭借该片获得了第2届华鼎奖之中国年度影视表现最佳女演员奖等奖项。2008年10月份，马伊琍主演年代剧《美丽无声》；11月份，怀孕期间拍摄的情感剧《锁春记》首播。

　　2010年8月16号，马伊琍和佟大为等人共同主演的情感剧《婚姻保卫战》首播，马伊琍凭借该剧获得第1届亚洲彩虹奖之最佳女喜剧演员奖；8月18号，马伊琍出演的年代商战剧《经纬天地》在央视八套黄金强档首播，该剧是马伊琍产夜己立重后复出的第一部电视剧；10月份，马伊琍主演青春励志剧《青春期撞上更年期》，并凭借该剧获得优酷影视指数盛典——2011开年盘点之开年优酷指数最佳女演员奖。2011年4月份，马伊琍与范伟等人共同主演喜剧片《跟踪孔令学》，并凭借该片获得第3届英国万像国际华语影片节之优秀女配角奖。7月份，马伊琍与涂松岩共同领衔主演都市情感剧《双城生活》，并凭借该剧获得了2011国剧盛典-年度最佳女演员奖。

　　2012年6月份，马伊琍与李晨共同主演情感剧《风和日丽》。2013年3月29号，马伊琍在2012中国电视剧年度明星盛典中获得表演突破奖；9月份，与文章共同主演都市情感剧《小爸爸》，该剧是马伊琍第一次担任制片人。2015年11月份，马伊琍主演都市情感剧《北上广不相信眼泪》，并凭借该剧获得第19届华鼎奖之中国百强电视剧最佳女主角。2016年9月份，马伊琍与陈建斌共同主演都市情感剧《中国式关系》，并凭借该剧提名第23届上海电视节白玉兰奖的最佳女主角奖。

　　2017年3月份，马伊琍与文章共同主演谍战剧《剃刀边缘》。7月份，马伊琍主演都市情感剧《我的前半生》，在这部剧中扮演罗子君，并凭借该剧获得第24届上海电视节白玉兰奖的最佳女主角等奖项。7月27号，马伊琍参与演出“建国三部曲”系列影片的第三部《建军大业》。2018年9月3号，马伊琍和何赛飞等人共同主演影片《那些女人》，并凭借该片获得第21届上海国际影片节-影片频道传媒大奖-最受传媒关注女配角；9月14号，马伊琍和王学兵共同主演剧情片《未择之路》，并凭借该片获得第75届威尼斯国际影片节-“聚焦中国”单元焦点女演员禁巩提奖；10月5号，马伊琍和姚晨共同主演剧情片《找到你》，并凭借该片获得第十届中国影片导演协会2018年度奖-年度女演员奖、第25届华鼎奖-中国影片最佳女主角等多个奖项。

　　2019年5月份，马伊琍与富大龙等人共同主演影片《进京城》，并凭借该片提名第21届上海国际影片节-影片频道传媒大奖-最受传媒关注女主角；9月份，马伊琍与刘烨共同领衔主演的都市创业剧《在远方》播出，并凭借该剧提名第26届上海电视节白玉兰奖-最佳女主角。2020年5月份，马伊琍等人领衔主演的都市职场剧《在不安的世界安静地活》杀青；8月份，马伊琍与高伟光共同领举婶垫衔主演的民国情感剧《旗袍美探》网台同播，并凭借该剧获得第29届华鼎奖-中国近现代题材电视剧最佳女演员。2021年12月份，马伊琍与徐峥等人共同主演爱情片《爱情神话》，并凭借该片提名第33届华鼎奖-中国影片最佳女主角。2022年4月份，马伊琍与白宇共同领衔主演的电视剧《龙城》杀青；8月份，马伊琍加盟综艺节目《跃上高阶职场》；11月3号，由王家卫执导、马伊琍等人主演的剧集《繁花》正式官宣。

　　2023年3月3号，网剧《交错的场景》正式官宣由马伊琍等人领衔主演。